国产国产伦锂片-国产国产成人久久精品杨幂-国产国产成人精品久久-国产馆在线观看免费的-国产馆在线观看-国产观看精品一区二区三区

咨詢熱線

400-028-6680

當前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  臺式低速冷凍離心機提取細胞質(zhì)和細胞核蛋白離心詳細步驟

臺式低速冷凍離心機提取細胞質(zhì)和細胞核蛋白離心詳細步驟

更新時間:2021-09-08      點擊次數(shù):2946
   臺式低速冷凍離心機,轉(zhuǎn)速一般不超過4000r/min,最大容量為2~4L,是實驗室于大量初級分離提取生物大分子、沉淀物等。其轉(zhuǎn)頭多用鋁合金制的甩平式和角式兩種,離心管有硬質(zhì)玻璃、聚乙烯硬塑料和不銹鋼管多種型號。離心機裝配有驅(qū)動電機、定時器、調(diào)整器(速度指示)和制冷系統(tǒng)(溫度可調(diào)范圍為-20~+40℃),可根據(jù)離心物質(zhì)所需,更換不同容量和不同型號轉(zhuǎn)速的轉(zhuǎn)頭。
  臺式低速冷凍離心機提取細胞質(zhì)和細胞核蛋白離心詳細步驟:
  1.決定細胞生長狀態(tài),細胞生長狀態(tài)應(yīng)該是80%或者更好:
  2.用離心機以1500r/min離心5min
  3.棄上清液,用等體積的冷PBS洗細胞,像步驟2那樣,反復(fù)3次
  4.根據(jù)估計的沉淀量加入5倍體積的isotoniclysisbuffer到細胞顆粒中,使細胞溫和懸浮,盡量避免泡沫
  5.加入裂解液lysisbuffer在懸浮的細胞中,并放在冰上15min讓細胞膨脹,可以通過顯微鏡檢查
  6.對于細胞實驗中膨脹的細胞,加入10%的IGEPALCA-630使最后的濃度達到0.3%,混勻,加的時候要溫和
  7.立即離心(量大的可以用1.5ml的EP管,以5500r/min離心30s;量大的可以用50ml的管子以5500r/min離心2min)
  8.轉(zhuǎn)移上清液(細胞質(zhì)蛋白)到一個新的冷凍管中
  9.用懸浮顆粒5倍體積的isotoniclysisbuffer懸浮細胞,并混勻
  10.用離心機離心細胞懸浮液,以1500r/min離心5min,移掉上清液
  11.用2/3倍體積的extractionbuffer懸浮顆粒
  12.把管子放置在震蕩混勻器上,以700r/min,15min震蕩混勻,接著以1400r/min,15min,整個過程要仔細,避免泡沫產(chǎn)生
  13.以9400r/min離心15min,低溫離心完后轉(zhuǎn)移上清液到一個新的冷凍離心管中
  14.分成幾份用液氮冷凍,并且保存起來(長期保存應(yīng)放在-80℃上,短期保存要放在-20℃上)

聯(lián)系我們

四川蜀科儀器有限公司 公司地址:四川省成都市溫江區(qū)海旺路99號5號樓   技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)
  • 聯(lián)系人:曾先生
  • QQ:599353114
  • 公司傳真:028-61985396
  • 郵箱:[email protected]

掃一掃 更多精彩

微信二維碼

主站蜘蛛池模板: 亚洲欧美日韩高清在线看 | 国产精品日本一区二区不卡视频 | 激情啪啪精品一区二区 | 久久久久国产精品免费网站 | 久久国产精品成人免费 | 久久久综合结合狠狠狠97色 | 榴莲视频丝瓜无限视频app | 亚洲最大在线 | 99热成人精品免费久久 | 国产视频综合 | 狠狠色伊人亚洲综合第8页 狠狠色网站 | 特级毛片aaaa级毛片免费 | 国产九色在线 | 麻豆影视的经典视频 | 免费观看一级毛片 | 亚洲一区二区视频在线观看 | 亚洲精品香蕉婷婷在线观看 | 成人 在线欧美亚洲 | 亚洲第一区精品日韩在线播放 | 国产福利毛片 | 亚洲va在线va天堂成人 | 女人l8毛片a级18女人水真多 | 免费精品美女久久久久久久久 | 日本免费一区二区三区中文 | 人人草视频在线观看 | 色aaa| 欧美日韩性视频一区二区三区 | 久久777国产线看观看精品卜 | www亚洲一区| 亚洲欧美日韩在线精品一区二区 | 色综合久久久久久888 | 国内黄色一级精品 | 精品一区 二区三区免费毛片 | 一级成人黄色片 | 青青草手机在线视频 | 久久精品国产91久久麻豆自制 | 日韩在线伦理片免费观看 | 欧美日韩一区不卡 | 国产特级毛片aaaaaa毛片 | 国产亚洲人成网站在线观看不卡 | 99国产精品视频免费观看 |